Hieff Mut™ Multi Site-Directed Mutagenesis Kit多點突變試劑盒說明書
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit是基于Hieff CloneTM快速克隆技術(shù)的定點突變系統(tǒng)。使用本試劑盒，可一次性向目標(biāo)質(zhì)粒上三至五個不連續(xù)位點（相距超過50bp）同時引入定點突變。該試劑盒由兩個模塊組成：HieffTM II Pfu DNA Polymerase擴增模塊和Hieff CloneTM快速克隆模塊。HieffTM II Pfu DNA Polymerase超高的保真度顯著降低了擴增過程中引入新突變的可能性，其卓越的長片段擴增能力，廣泛適用于長度小于20 kb的任何質(zhì)粒擴增。Hieff CloneTM快速克隆系統(tǒng)利用高效的同源重組反應(yīng)替代傳統(tǒng)的退火成環(huán)反應(yīng)。因此使用Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit進行DNA定點突變時，引物設(shè)計更加靈活，且擴增反應(yīng)以指數(shù)方式進行，極大減少了模板使用量，有利于原始甲基化模板的徹底降解。
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit中的重組酶Exnase MultiS經(jīng)過優(yōu)化，專門針對多堿基進行定點突變。此外，如擴增產(chǎn)物特異，其DpnI消化產(chǎn)物可不進行DNA純化而直接用于重組反應(yīng)。高度優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、快捷的操作流程以及極高的成功率，使得Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit成為DNA多點突變首選試劑盒。
應(yīng)用范圍
DNA定點突變
【注】：如使用本品對質(zhì)粒進行定點突變，請使用甲基化酶無缺陷的宿主菌 (例如Top10、DH5α、JM109)擴增原始質(zhì)粒！
產(chǎn)品組成
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編號 |
組分 |
產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
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11004ES10 （10 T） |
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11004-A |
2×HieffTM II PCR buffer |
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11004-B |
dNTP Mix (10 mM each) |
50 μl |
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11004-C |
HieffTM II Pfu DNA Polymerase (1 U/μl) |
50 μl |
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11004-D |
Dpn I (10 U/μl) |
50 μl |
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11004-E |
2× Hieff Clone MultiS Enzyme Premix |
100 μl |
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產(chǎn)品-20 ºC保存。有效期1年。
不連續(xù)多堿基（相距超過50bp）定點突變實驗流程（以不連續(xù)三堿基為例）
