產(chǎn)品描述
限制性內(nèi)切酶Dpn I可有效識(shí)別并切斷腺嘌呤甲基化的GmATC,而不能切斷非甲基化的GATC序列。從(dam+)菌株中提取的質(zhì)粒因已經(jīng)被甲基化,可作為Dpn I的底物。該產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于分子克隆、基因分型、DNA印跡、RFLP技術(shù)、SNP等多項(xiàng)技術(shù)領(lǐng)域。
酶切位點(diǎn)
5, GAm6↓TC 3,
3, CT↑Am6G 5,
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) |
組分名稱 |
規(guī)格 (11001ES76,500 U) |
11001-A |
Dpn I (10 U/μL) |
50 μL |
11001-B |
10×Buffer Tango (With BSA) |
1 mL |
活性定義
在50 μL反應(yīng)體系中,37 ºC,1 h完全消化1 μg甲基化pBR322 DNA的酶量定義為1個(gè)酶活性單位(U)。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20保存。
使用方法
1. 配制反應(yīng)體系(20 μL)
組分 |
加入量 |
終濃度 |
10×Buffer Tango (With BSA) |
2 μL |
1× |
Dpn I |
0.5-2 μL |
0.25-1 U/μL |
DNA(0.5-1 μg/μL) |
1 μL |
25-50 ng/μL |
Nuclease-free water |
Up to 20 μL |
- |
2. 反應(yīng)程序
1)孵育:37℃,1-16 h。注:具體消化時(shí)間根據(jù)自己的試驗(yàn)情況確定,勿超過(guò)16 h。
2)失活反應(yīng):20 min 即可。
注意事項(xiàng)
1)Dpn I適合切開(kāi)完全甲基化的位點(diǎn),對(duì)于半甲基化的位點(diǎn)作用較弱
2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。