BIOGHSC一步法超級(jí)熒光定量PCR試劑盒（探針）說(shuō)明書(shū)

BIOG^HSC一步法超級(jí)熒光定量PCR試劑盒（探針）

產(chǎn)品介紹 

BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit專(zhuān)為以RNA為模板的定量PCR檢測(cè)而設(shè)計(jì)，適合熒光探針?lè)ǘ�量PCR分析。使用BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個(gè)反應(yīng)管內(nèi)一步完成，中間無(wú)開(kāi)管和移液動(dòng)作，操作非常簡(jiǎn)便，也大大提高了實(shí)驗(yàn)的效率，并降低了反應(yīng)的污染風(fēng)險(xiǎn)。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit使用我們最新研制優(yōu)化的緩沖液，確保了反轉(zhuǎn)錄和定量PCR反應(yīng)能夠快速、高效地完成。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit的檢測(cè)靈敏度可達(dá)到1pg總RNA，與其它品牌的同類(lèi)產(chǎn)品相比，具有更高的檢測(cè)靈敏度。各反應(yīng)成分以 Mix的形式提供，非常方便實(shí)驗(yàn)者使用。

產(chǎn)品特點(diǎn)

◎逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個(gè)反應(yīng)管內(nèi)一步完成，操作簡(jiǎn)便快速；

◎使用我們最新研發(fā)的超級(jí)熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性更高，酶動(dòng)力更強(qiáng)，特別適合多重PCR反應(yīng)；

◎反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，靈敏度高，最低可檢測(cè)1pg總RNA中的目標(biāo)片段,特別適合低拷貝RNA的檢測(cè)；                    

◎添加了百代生物RT-PCR專(zhuān)利活素，可明顯提升RT-PCR的產(chǎn)量，CT值一般早3-5循環(huán)，S型曲線(xiàn)更加典型。

產(chǎn)品成分                   反應(yīng)體系

說(shuō)明：

1、BIOGHSC Super MultiProbe Mix包含dNTP Mix和Mg2+，BIOGHSC Super Enzyme Mix包含BIOG超級(jí)逆轉(zhuǎn)錄酶和BIOG超級(jí)熱啟動(dòng)聚合酶、熒光保護(hù)素。

2、一般來(lái)說(shuō)反應(yīng)體系中引物終濃度為0.3μM可得到較好的擴(kuò)增效果。進(jìn)行多重PCR反應(yīng)時(shí)，不同靶基因引物的濃度搭配可以在0.1-1.0μM范圍內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。

3、TaqMan探針終濃度可以在0.1μM-0.45μM之間調(diào)整，進(jìn)行多重PCR反應(yīng)時(shí)，不同靶基因探針的濃度搭配應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。

4、qPCR反應(yīng)靈敏性高，模板量的準(zhǔn)確性對(duì)結(jié)果影響很大，建議將模板適度稀釋后加入，或用50ul反應(yīng)體系。

5、模板體積最好不超過(guò)反應(yīng)體積的10%。

6、擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度請(qǐng)選擇在100bp-500bp范圍內(nèi)，最好為100-200bp。

7、配制反應(yīng)體系時(shí)，避免震蕩混勻，以防氣泡產(chǎn)生。

8、反應(yīng)條件：先于42℃逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)20分鐘，再于95℃加熱10分鐘，以激活熱啟動(dòng)DNA聚合酶，然后95℃ 15秒，60℃ 35秒，35-40個(gè)循環(huán)。該反應(yīng)條件可根據(jù)目標(biāo)片段的大小、引物的Tm值、檢測(cè)基因的多少等適當(dāng)調(diào)整。

9、如果模板具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)，可將反應(yīng)溫度提高至55℃，有助于提高產(chǎn)量。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性 

干冰或藍(lán)冰運(yùn)輸，-20°C 儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融 。 

如每次使用量較少，推薦小份分裝使用。

有效期

-20℃保存條件下，有效期為1年。

質(zhì)量控制

所有組分經(jīng)檢測(cè)均無(wú)核酸外切酶，核酸內(nèi)切酶，RNase殘留。

注意

本產(chǎn)品僅用于科研