CRISPR-Cas9源自細菌及古菌中用以抵御病毒和外源DNA入侵的免疫調(diào)控系統(tǒng)。在II型CRISPRE系統(tǒng)中, CRRNA與 tracrrna配對形成復(fù)合物能特異識別基因組序列,引導(dǎo)Cas9核酸內(nèi)切酶對目的DNA切割產(chǎn)生雙鏈斷裂( double- strand breaks,DSBs對 CRRNA和TRACRRNA進行二合一優(yōu)化獲得 SGRNA同樣能引導(dǎo)Cas9進行靶向切割。 SGRNA-Cas9系統(tǒng)的高效基因靶向切割功能已被廣泛應(yīng)用于斑馬魚、小鼠、大鼠、秀麗隱桿線蟲、植物及細菌等多種生物體中。
競遠生物為客戶感興趣的基因提供 SGRNA( (single-guide RNA)設(shè)計與克隆構(gòu)建服務(wù)。SGRNA克隆表達一個單鏈的融合 SRNA(由 CIRNA和 Itracrrna融合而成)。當(dāng)Cas9核酸酶存在時, SGRNAF能識別靶標(biāo)DNA序列并引導(dǎo)Cas9核酸酶剪切靶標(biāo)位點,形成DNA雙鏈斷裂(DSBs),進而實現(xiàn)基因敲除、敲入及突變等基因組編輯。多個 SGRNAI克隆與一個Cas9克隆共轉(zhuǎn)染可同時在基因組中編輯多個位點,使實驗設(shè)計更高效、更靈活。根據(jù)不同的需求,竟遠提供 SGRNA單表達的克隆, SGRNA與Cas9二合一表達克隆, SGRNA與Cas9,GFP三合一表達克隆。同時還提供慢病毒和腺相關(guān)病毒載體的sRNA表達克隆。
競遠生物長期致力于基因編輯領(lǐng)域,擁有經(jīng)驗豐富的專家團隊和成熟穩(wěn)定的基因編輯技術(shù)平臺,可有效實現(xiàn)細胞系特定基因的定點突變、敲入等細胞系的定制。
服務(wù)優(yōu)勢:
1.成熟穩(wěn)定的基因編輯平臺:競遠生物已完成萬例基因編輯項目,并建立了細胞株敲除的金標(biāo)準(zhǔn)。
2.獨特的 CRISPR/Cas9編輯技術(shù):經(jīng)過特殊優(yōu)化的 CRISPR/Cas9技術(shù),可使外源基因在細胞中穩(wěn)定糒準(zhǔn)表達,可用來高效構(gòu)建點突變細胞株。
3.一流的專家技術(shù)團隊:由國際知名基因編輯專家領(lǐng)銜,團隊技術(shù)專業(yè),經(jīng)驗豐富。
4.100%成功保證:競遠生物承諾,項目不成功全額退款。