mRNA實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)服務(wù)

mRNA qPCR service

康成為您提供的一站式mRNA實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，您只需要提供保存完好的組織或細(xì)胞標(biāo)本，本公司專業(yè)技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成mRNA實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)操作和數(shù)據(jù)分析，提供給您完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

服務(wù)類別：	分子與細(xì)胞	總訪問：	902
最后更新：	2018-11-26	半年訪問：	25
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mRNA實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)服務(wù)

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)即是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR避免了傳統(tǒng)PCR以終產(chǎn)物檢測(cè)定量產(chǎn)生的偏差，提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化、比較不同組織的mRNA表達(dá)差異、驗(yàn)證基因芯片和siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

康成生物為您提供的一站式mRNA實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，您只需要提供保存完好的組織或細(xì)胞標(biāo)本，本公司專業(yè)的技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成mRNA實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)操作和數(shù)據(jù)分析，提供給您完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，為您節(jié)省大量的時(shí)間和精力。全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成；定量PCR儀器為美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司生產(chǎn)的熒光定量PCR儀ABI PRISM 7900、Corbett Research公司生產(chǎn)的離心式實(shí)時(shí)定量PCR儀Rotor-Gene 3000。

康成生物mRNA實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)服務(wù)流程
1. 設(shè)計(jì)并合成Realtime PCR引物
2. 引物溶解后使用Promega的TaqDNA聚合酶進(jìn)行含SG（SYBR® Green）的PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
3. RNA抽提
    a. 若實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品，取適量（50-100mg）新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，加1ml的RNA抽提試劑Trizol（Invitrogen），勻漿后抽提RNA。
    b. 若實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品，每份樣品取1×106～1×107細(xì)胞，完全吸去培養(yǎng)液后加1ml的RNA抽提試劑Trizol（Invitrogen），裂解后抽提RNA。
4. RNA質(zhì)量檢測(cè)
    a. 紫外吸收測(cè)定法測(cè)定RNA在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，以計(jì)算其濃度并評(píng)估RNA純度。
    b. 使用甲醛電泳試劑（ambion）進(jìn)行變性瓊脂糖凝膠電泳，檢測(cè)RNA純度及完整性。
5. cDNA合成
     按照逆轉(zhuǎn)錄酶（Invitrogen或Promega）5. 使用說明將樣品RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。
6. 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(可選)
    進(jìn)行相對(duì)定量，需要先將樣品的目的基因以及管家基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其產(chǎn)物進(jìn)行梯度稀釋用于做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
7. 實(shí)時(shí)定量PCR
     標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品和待測(cè)樣品分別加入到含SG的RealTime PCR反應(yīng)液中（其中TaqBead熱啟動(dòng)聚合酶來自Promega公司），進(jìn)行RealTime PCR擴(kuò)增和檢測(cè)
8. 數(shù)據(jù)分析
    檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線分析，以對(duì)待測(cè)樣品的目的基因進(jìn)行定量。相對(duì)定量實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)一步用樣品的目的基因測(cè)得值除以管家基因測(cè)得值以校正誤差，所得結(jié)果代表某樣品的目的基因相對(duì)含量。9. 提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告：包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相關(guān)圖表。

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地址：上海市漕河涇高新技術(shù)開發(fā)區(qū)虹漕路421號(hào)63號(hào)樓2樓
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上�？党缮锕こ逃邢薰咀�2002年起專注于生物科研技術(shù)服務(wù)，是國(guó)內(nèi)最早一批專業(yè)提供生命科學(xué)前沿研究技術(shù)服務(wù)的高科技企業(yè)。為進(jìn)一步拓展在醫(yī)學(xué)科研服務(wù)領(lǐng)域業(yè)務(wù)的深度和廣度，向多譜領(lǐng)域發(fā)展，重塑品牌 Aksomics（數(shù)譜生物）。Aksomics全面整合公司在非編碼RNA（lncRNA、circRNA、small RNA等）、表觀遺傳學(xué)、蛋白組學(xué)等檢測(cè)方向的核心技術(shù)，依靠自身優(yōu)秀的研發(fā)、技術(shù)、營(yíng)銷和服務(wù)團(tuán)隊(duì)，憑借國(guó)際領(lǐng)先的技術(shù)平臺(tái)和高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)控體系，形成了涵蓋表觀基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)及代謝組學(xué)等各個(gè)研究領(lǐng)域的一站式技術(shù)平臺(tái)。

【表觀基因組學(xué)】 DNA甲基化芯片、DNA羥甲基化芯片、染色質(zhì)免疫共沉淀芯片、DNA甲基化測(cè)序、DNA羥甲基化測(cè)序、染色質(zhì)免疫共沉淀測(cè)序、MeDIP-PCR、hMeDIP-PCR、ChIP-PCR等

【轉(zhuǎn)錄組學(xué)】LncRNA芯片、LncPath™芯片、環(huán)狀RNA芯片、T-UCR芯片、microRNA芯片、piRNA芯片、全基因組表達(dá)譜芯片、RNA測(cè)序、RNA m6A甲基化測(cè)序、small RNAs測(cè)序系列（microRNA測(cè)序、tRF&tiRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、piRNA測(cè)序等）、LC-MS tRNA修飾檢測(cè)、 nrStar™ ncRNA PCR芯片（tRF&tiRNA，tRNA，snoRNA，F(xiàn)unctional LncRNA）、miRStar™癌癥特異性microRNA PCR芯片、NuRNATM mRNA PCR芯片、功能分類PCR芯片、LncRNA實(shí)時(shí)定量PCR、環(huán)狀RNA實(shí)時(shí)定量PCR、tRF&tiRNA實(shí)時(shí)定量PCR、microRNA實(shí)時(shí)定量PCR、mRNA實(shí)時(shí)定量PCR

【蛋白組學(xué)平臺(tái)】TMT標(biāo)記定量蛋白組學(xué)服務(wù)、Lable-free定量蛋白組學(xué)服務(wù)、磷酸化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、泛素化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、N-糖基化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、乙酰化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、蛋白-蛋白相互作用組學(xué)

【代謝組學(xué)】靶向代謝組學(xué)、非靶向代謝組學(xué)

【外泌體組學(xué)】外泌體轉(zhuǎn)錄組學(xué)、外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)、外泌體代謝組學(xué)
康成生物為Agilent、Arraystar、Exiqon、Illumina、Qiagen、Thermo Fisher等國(guó)際知名品牌提供技術(shù)服務(wù)�？党煽蛻舨捎酶黝惣夹g(shù)服務(wù)發(fā)表的SCI論文已超560篇。康成生物將持續(xù)聚焦生命科學(xué)發(fā)展的挑戰(zhàn)，提供有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)，持續(xù)為客戶創(chuàng)造最大價(jià)值。

聯(lián)系方式：
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