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熒光定量PCR服務 & SNP分型服務

熒光定量PCR服務 & SNP分型服務


ECO Real-Time PCR & SNP
熒光定量PCR技術指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
服務類別:分子與細胞總訪問:1475
最后更新:2015-8-19半年訪問:19
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熒光定量PCR服務
 
ECO Real-Time PCR技術指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環(huán)擴增產(chǎn)物量的變化,通過Ct值和標準曲線的分析對起始模板進行定量分析。免費設計優(yōu)化引物,使定量PCR反應擴增效率達到90%以上,使相對定量結果更可靠。
 
系統(tǒng)特點
1. 超高準確率的qPCR結果:動態(tài)范圍> 9 logs線性范圍;擁有檢測低于1個拷貝的超高靈敏度;對于辨別5000-10000的高拷貝區(qū)域也有99%的可性度。
2. 良好的均一性和可重復性:沒有邊緣效應產(chǎn)生,整塊板子Cq的標準偏差等于0.063;不同批次的重復性高(R2=0.996)。
3. 可以實現(xiàn)High Resolution Melt(HRM)分析:其應用在突變掃描、序列配對和基因分型等多個方面。
 
 
技術路線
 
樣品要求
1) 樣品類型:細胞、新鮮組織。
2) RNA樣本要求:無明顯降解,OD260/280值在1.9~2.1之間,濃度≥100ng/ul;DNA應該去除干凈;qPCR反應中,一個基因需要500ng RNA的量。
3) DNA樣本要求:DNA無明顯降解,OD260/280值在1.7~1.9之間,濃度≥ 50ng/μl;qPCR反應中,一個SNP位點需要50ng DNA的量。
 
SNP分型服務
 
單核苷酸多態(tài)性(SNP,Single Nucleotide Polymorphism):是指在基因組水平上單個核苷酸變異所引起的DNA序列多態(tài)性。SequenomMassARRAY® 平臺利用SNP位點兩個等位基因之間的分子量差異來進行檢測;驹頌榛|輔助激光解吸電離飛行時間質譜 (MALDI-TOF MS) 技術。
 
技術特點
1. 靈活:自由選擇感興趣的SNP位點,一張芯片上,樣本和SNP位點的配對、樣本數(shù)量及位置可以自由選擇
2. 準確:直接檢測測序分子量,準確度超過99.7%。
3. 高通量:一張芯片上可完成384個樣品的多重IPLEX GOLD 實驗;每個反應孔可實現(xiàn)18至40重反應。
 
技術路線
 
樣品要求
1. DNA樣品:
1)避免肝素抗凝,避免EDTA溶解,避免反復凍融;
2)DNA濃度約10ng/ul , OD260/OD280=1.8;
3) 每反應提供5ul DNA。
2. SNP位點:
序列格式:SNP位點前后各100bp,SNP以[A/G]表示,其它突變以N表示;
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