細(xì)胞因子在健康和疾病中的復(fù)雜生物學(xué),從病毒和細(xì)菌感染到對抗癌細(xì)胞的免疫系統(tǒng),使它們成為研究和診斷分析的主要焦點(diǎn)。然而,檢測細(xì)胞因子帶來了各種挑戰(zhàn)。它們的影響和功能與它們的細(xì)胞外表達(dá)水平直接相關(guān),而細(xì)胞外表達(dá)水平通常隨空間位置而急劇變化。此外,它們的基線水平通常非常低,在皮摩爾范圍內(nèi)。最后,細(xì)胞因子溶解在細(xì)胞外液中,這極大地限制了適用的檢測方法。
1、酶聯(lián)免疫法檢測
由于液體生物樣品所需的靈敏度、范圍和適用性,酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)通常是檢測和定量細(xì)胞因子的首選方法。通過ELISA對分析物進(jìn)行定量依賴于免疫篩選,即抗體特異性結(jié)合特定分子靶標(biāo)的能力。ELISA特別適合分析液體生物樣品,包括血清和血漿、淋巴液,以及更多組織特異性液體,如滑液或腦脊液,以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞和組織裂解物。此外,可以輕松獲得低皮摩爾范圍內(nèi)的靈敏度。由于細(xì)胞因子是小蛋白靶標(biāo),因此選擇的方法通常是雙抗夾心法。雙抗夾心法檢測是由兩種靶標(biāo)特異性抗體的獨(dú)立識別靶標(biāo),因此所得測定結(jié)果通常具有高靈敏度和特異性。然而,ELISA檢測需要相對大量的珍貴樣品,此外下一代方法通常提供更高的檢測通量。
2、Luminex液相細(xì)胞因子芯片技術(shù)
Luminex技術(shù)(Luminex液相細(xì)胞因子芯片)同樣也是雙抗夾心法原理,它基于特殊的磁珠,磁珠通過熒光染料染色獲得熒光編碼,每個熒光編碼的磁珠組都涂有對應(yīng)的特定的捕獲抗體,生物素標(biāo)記的檢測抗體與磁珠組上的特異性細(xì)胞因子捕獲抗體復(fù)合物結(jié)合,偶聯(lián)了鏈霉親和素的熒光,因生物素與鏈霉親和素的結(jié)合而得以結(jié)合在檢測抗體上。因此,可以使用Luminex檢測儀器,通過檢測磁珠組的熒光編碼差異以及熒光信號值強(qiáng)弱來識別和測量樣本中的多種細(xì)胞因子。與傳統(tǒng)ELISA相比,Luminex技術(shù)具有多重優(yōu)點(diǎn),包括:(a)高通量多重分析;(b)所需的樣品量更少;(c)時間和成本方面的效率;(d)在多個其他炎癥分子的背景下評估一種給定炎癥分子的水平的能力;(e)在相同的實(shí)驗(yàn)測定條件下對相同參與者的相同細(xì)胞因子組合進(jìn)行重復(fù)測量的能力;(f)能夠在廣泛的濃度動態(tài)范圍內(nèi)可靠地檢測不同的蛋白質(zhì)。
3、華盈生物的解決方案
華盈生物為各種研究領(lǐng)域提供穩(wěn)定可靠的細(xì)胞因子檢測技術(shù)服務(wù),在業(yè)界我們的技術(shù)服務(wù)享有很高的口碑。華盈生物在細(xì)胞因子檢測分析方面擁有數(shù)十年的經(jīng)驗(yàn),可滿足我們科學(xué)界不斷變化的需求。Luminex細(xì)胞因子檢測技術(shù)用于各種研究領(lǐng)域,包括炎癥和癌癥研究。有關(guān) Luminex的更多信息,請聯(lián)系我們的銷售團(tuán)隊(duì)或技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)以獲得進(jìn)一步的支持和幫助。