RAYPA培養(yǎng)基自動(dòng)制備應(yīng)用案例：生活飲用水耐熱大腸菌檢測

方案摘要：根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)，生活飲用水中不應(yīng)含有病原微生物，其中菌落總數(shù)不能超過100個(gè)CFU／ML），耐熱大腸菌群限值為不應(yīng)檢出。本方案利用培養(yǎng)基自動(dòng)制備分裝儀（一種集培養(yǎng)基制備、滅菌、分裝于一體的自動(dòng)化設(shè)備），可精準(zhǔn)控制培養(yǎng)基的配方比例、滅菌條件（如溫度、壓力、時(shí)間）和分裝體積，減少人工操作誤差，在大批量檢測中，可有效提升檢測效率。
 
方案詳情：
一、實(shí)驗(yàn)原理
耐熱大腸菌（又稱糞大腸菌群）是一類能在44.5℃培養(yǎng)條件下生長繁殖的腸桿菌科細(xì)菌，主要來源于人和動(dòng)物糞便，是飲用水受糞便污染的重要指示菌。檢測方法通常采用多管發(fā)酵法或?yàn)V膜法，需使用特定培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，通過觀察產(chǎn)氣現(xiàn)象或菌落特征判斷是否存在目標(biāo)菌。RAYPA培養(yǎng)基自動(dòng)制備分裝儀可精準(zhǔn)控制培養(yǎng)基的制備流程，確保檢測過程中培養(yǎng)基的成分、滅菌條件和分裝精度符合微生物培養(yǎng)要求，從而實(shí)現(xiàn)對耐熱大腸菌的高效分離、培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。
 
二、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1、培養(yǎng)基和試劑
① EC培養(yǎng)基
② 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基
 
2、儀器與設(shè)備
①  恒溫水浴箱或培養(yǎng)箱：44.5℃±0.5℃。
②  RAYPA培養(yǎng)基自動(dòng)制備分裝儀。
 
三、實(shí)驗(yàn)步驟
1、使用RAYPA培養(yǎng)基自動(dòng)制備分裝儀，自動(dòng)制備和分裝實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基。
 
2、自總大腸菌群乳糖發(fā)酵試驗(yàn)中的陽性管(產(chǎn)酸產(chǎn)氣)中取1滴轉(zhuǎn)種于EC培養(yǎng)基中，置44.5℃±0.5℃水浴箱或隔水式恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)(水浴箱的水面應(yīng)高于試管中培養(yǎng)基液面)，培養(yǎng)24h±2h，如所有管均不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為未檢出，如有產(chǎn)氣者，則轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，置44.5℃±0.5℃培養(yǎng)18 h~24 h，凡平板上有典型菌落者，則證實(shí)為耐熱大腸菌群陽性。
3、如檢測未經(jīng)含氯消毒劑消毒的水，且只想檢測耐熱大腸菌群時(shí)，或調(diào)査水源水的耐熱大腸菌群污染時(shí)，可直接用多管發(fā)酵法，將接種乳糖蛋白陳培養(yǎng)液后直接在44.5℃±0.5 ℃培養(yǎng)18h~24 h，凡平板上有典型菌落者，則證實(shí)為耐熱大腸菌群陽性。
 
四、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理
根據(jù)證實(shí)為耐熱大腸菌群陽性的管數(shù)，對照MPN表，報(bào)告每100mL水樣中耐熱大腸菌群的MPN值。