人細胞株步驟方法與注意事項

人細胞株​注意事項：

1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月；

2、在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作；

3、傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)；

4、如果您的實驗時間較長， 請在收到細胞后傳代時，按細胞量分種2瓶，使用其中的一瓶細胞實驗，其余的細胞先凍存起來。下次實驗需要時，再復(fù)蘇；

5、該 NK-92細胞，人細胞株，培養(yǎng)技術(shù)只可用于科研。

6、需要更多信息，請致電 ！

人細胞株步驟： 

（1）操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。 

（2）自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。

（3）將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。

（4）取出冷凍管，立即放入37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，以70%酒精擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。 

（5）取出解凍之細胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)（稀釋比例為1：10～1：15），混合均勻，放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1ml解凍細胞懸浮液作存活測試。

（6）解凍后是否立即去除冷凍保護劑（例如DMSO或glycerol），依細胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護劑。惟若要立即去除，則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10ml培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心1000rpm，5分鐘，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 

（7）若不需立即去除冷凍保存劑，則在解凍培養(yǎng)后隔日更換培養(yǎng)基。