進(jìn)口Elisa試劑盒步驟的原理

進(jìn)口Elisa試劑盒操作步驟：

​1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣進(jìn)口Elisa試劑盒將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.  溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

100mg 鹽酸米安色林 含量測定 常溫，避光 4.  配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此

重復(fù) 5 次，拍干。

6.  加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。

7.  溫育：操作同 3。

8.  洗滌：操作同 5。

9.  顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入進(jìn)口Elisa試劑盒顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色） 。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） 。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)

進(jìn)口Elisa試劑盒原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中進(jìn)口Elisa試劑盒水平。用純化的抗體包被微孔板，制

成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次進(jìn)口Elisa試劑盒，再與 HRP 標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-

抗原-抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB 在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在

酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的進(jìn)口Elisa試劑盒呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀

在 450nm 波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中進(jìn)口Elisa試劑盒濃度。