數(shù)字PCR在食品安全檢測(cè)的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):2344 發(fā)布日期:2019-12-21
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食品安全日益成為一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題, 受到社會(huì)及國(guó)家的高度重視。食源性疾病、食品原料造假、轉(zhuǎn)基因食品等逐漸呈現(xiàn)出普遍增長(zhǎng)的趨勢(shì)。
食源性疾病是指通過(guò)攝食而進(jìn)入人體的有毒有害物質(zhì)等致病因子所造成的疾病。比如常見(jiàn)的食物中毒、腸道傳染病、人畜共患傳染病、寄生蟲(chóng)病等。食源性疾患的發(fā)病率居各類(lèi)疾病總發(fā)病率的前列,是當(dāng)前世界上最突出的衛(wèi)生問(wèn)題。能夠從源頭進(jìn)行預(yù)防以及控制是解決這一問(wèn)題的重中之重。食品原料造假也是危害國(guó)人健康的一大殺手,一些造假原料可能包含致癌物或者其他的有害物質(zhì)。
傳統(tǒng)檢測(cè)方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力,難以滿(mǎn)足對(duì)食品快速檢測(cè)的需求。數(shù)字PCR技術(shù)的出現(xiàn)為食品檢測(cè)提供了便利條件以及高效率檢測(cè),可以滿(mǎn)足當(dāng)下食品快速和精確監(jiān)測(cè)的需要。
我國(guó)首個(gè)數(shù)字PCR檢測(cè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)于2017年開(kāi)始實(shí)施,標(biāo)準(zhǔn)號(hào)為:GB/T33526-2017,名稱(chēng)為“轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品數(shù)字PCR檢測(cè)方法”,是由國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)聯(lián)合發(fā)布的。
目前用數(shù)字PCR對(duì)食品安全進(jìn)行研究成為了一種趨勢(shì),相對(duì)于傳統(tǒng)PCR,數(shù)字PCR具有較好的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性,可實(shí)現(xiàn)絕對(duì)定量分析,為快速準(zhǔn)確地進(jìn)行食品安全檢測(cè)提供了一種嶄新的技術(shù)平臺(tái)。
數(shù)字PCR檢測(cè)金黃色葡萄球菌結(jié)果重復(fù)性較好。
數(shù)字PCR(Digital PCR-dPCR)技術(shù)是一種新的核酸檢測(cè)和定量方法,為第三代PCR,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)起始核酸樣品的絕對(duì)定量。如Naica 全自動(dòng)微滴芯片式數(shù)字PCR技術(shù)所展現(xiàn)的那樣,在反應(yīng)體系中加入熒光染料的同時(shí)將反應(yīng)體系進(jìn)行分區(qū),且分區(qū)多達(dá)30000個(gè)微滴,實(shí)現(xiàn)了單分子模板的擴(kuò)增,最后通過(guò)陽(yáng)性反應(yīng)器數(shù)出目標(biāo)序列的拷貝數(shù),可以對(duì)低拷貝基因進(jìn)行檢測(cè),彌補(bǔ)了熒光PCR的不足。數(shù)字PCR平臺(tái)憑借其優(yōu)勢(shì)已應(yīng)用在腫瘤學(xué)研究、NIPT研究、液態(tài)活檢、細(xì)胞治療質(zhì)控、用藥及移植監(jiān)控、致病微生物檢測(cè)、食品安全、環(huán)境檢測(cè)、核酸類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定量等方面。
2016年,法國(guó)Stilla Technologies推出Naica創(chuàng)新型微滴芯片式數(shù)字PCR系統(tǒng),直接在芯片上生成微滴,該系統(tǒng)目前為數(shù)字PCR領(lǐng)域的佼佼者。
☼ 可產(chǎn)生的有效微滴數(shù)高達(dá)30000,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他品牌。
☼ 3熒光通道,可使用多種熒光染料來(lái)標(biāo)記不同的要檢測(cè)的靶基因。
☼ 操作簡(jiǎn)便,一步上樣,從加樣到結(jié)果分析僅需兩個(gè)半小時(shí)。
可視化質(zhì)控:
微滴追溯:
顯著區(qū)分陰陽(yáng)性:
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