胰島素受體-β抗體的主要使用方法

     胰島素是全身代謝的主要調節(jié)激素之一。這種激素的生物學作用包括碳水化合物、蛋白質和脂質代謝的整合。胰島素增強葡萄糖、氨基酸和某些離子的膜轉運。它還促進糖原儲存，甘油三酯的形成和蛋白質和核酸的合成。免疫細胞化學研究在胰島B細胞中定位胰島素。胰島素缺乏導致糖尿病，是一般人群發(fā)病率和死亡率的主要原因之一。胰島素也存在于B細胞來源的腫瘤中，如胰島素瘤。 功能：
胰島素降低血糖濃度。它增加了細胞對單糖、氨基酸和脂肪酸的滲透性。它加速糖酵解、戊糖磷酸循環(huán)和肝糖原合成。
 胰島素受體-β抗體 主要操作步驟如下：
A.a. 在進行標記之前，先選用截流分子量為20000-50000的凝膠，制備ml凝膠柱，然后分別用0倍體積的%BSA/PBS/0.02%疊氮鈉和PBS洗滌柱體，封住柱下口，備用。
B. b加入0ug純化單抗至含有25ul 2.5mol/L磷酸鈉（PH7.5）的.5ml指形管內。隨后，加入500uCi Na25I混勻。
C. c 加入25ul新配制的2mg/ml氯胺T。室溫放置60秒。再加入50ul氯胺T終止液（含2.4mg/ml偏重亞鈉，0mg/ml酪氨酸，0%甘油和0.%環(huán)乙烷酰二甲苯的PBS  胰島素受體-β抗體 標記抗體大約在第二至第四管出現(xiàn)。無害化處理柱子和非單抗標記部分。e. 將標記單抗保存于4℃可使用6周時間。
D、d 生物合成法標記將雜交瘤細胞培養(yǎng)在含有放射性前體的培養(yǎng)基中，隨著抗體分子的合成、組裝，同位素會標記在抗體分子的初級氨基酸鏈上，本方法不會導致抗體活性的喪失。
檢測方法：熒光或著色沉淀，熒光標記物用特殊波長的光激發(fā)時發(fā)射出可見光。