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Cole-Parmer助力新冠病毒核酸檢測

瀏覽次數(shù):3193 發(fā)布日期:2020-2-17  來源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請注明出處
2019年12月底武漢發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒肺炎以來,感染確診病例和疑似病例數(shù)量仍在不斷上升,疑似病例的快速確診迫在眉睫。目前臨床上確診新型冠狀病毒肺炎病例,最通用的方式仍然是在臨床觀察的基礎(chǔ)上,采集痰液、咽拭子等呼吸道標(biāo)本進(jìn)行病毒核酸基因檢測,并作出病原學(xué)診斷。目前核酸檢測的準(zhǔn)確性問題牽動了很多人的心,除去該病毒的一些特有特征外,檢測過程中的每一個環(huán)節(jié)涉及的科學(xué)儀器和操作步驟都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響。

 

目前新冠狀病毒核酸檢測主要通過PCR檢測的方法,其對試驗(yàn)場地、檢驗(yàn)儀器及操作人員的要求都非常高,輕微的污染就可能對結(jié)果造成偏差。另外,對檢測樣本保存條件和設(shè)備也有很嚴(yán)苛的要求。并且,由于新冠狀病毒的傳染危險性,防護(hù)準(zhǔn)備和后續(xù)的消毒處理對整個檢測實(shí)驗(yàn)來說也異常重要。Cole-Parmer作為一家專業(yè)的科研儀器、設(shè)備、耗材供應(yīng)商,可以為新冠狀病毒核酸檢測提供從防護(hù),采樣,樣本保存,檢測,消毒處理等各環(huán)節(jié)支持。相信可靠的儀器設(shè)備及防護(hù)消毒產(chǎn)品一定能為這場戰(zhàn)役中的檢測工作添磚加瓦。Cole-Parmer與你們一起并肩作戰(zhàn)!

 

Cole-Parmer相關(guān)儀器配置單

 

以下是新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)的具體標(biāo)準(zhǔn)介紹,可供各位老師參考,其中涉及的儀器設(shè)備和耗材,疫情期間歡迎在微信平臺直接聯(lián)系我們,或者直接聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐匿N售或經(jīng)銷商。

 

新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)

 

一、樣本采集

通常是在采集地——定點(diǎn)發(fā)熱門診進(jìn)行樣本選取。樣本一般為鼻咽或口咽拭子、氣管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多(其陽性率非常高)

在采集過程中,Cole-Parmer可為您提供防護(hù)服,護(hù)目鏡,鞋套,以及手套等防護(hù)用品。

 

二、樣本的包裝、保存與運(yùn)輸

通常采樣管需經(jīng)過3層包裝,即:自封袋+運(yùn)輸罐+專用運(yùn)輸箱。在2-4℃進(jìn)行保存,(通常保存不能超過72小時),再通過UN2814感染性物質(zhì)專用運(yùn)輸箱,由經(jīng)過生物安全培訓(xùn)的專人,全身著防護(hù)用品運(yùn)送轉(zhuǎn)運(yùn)箱。

三、樣本的核酸檢測

實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)條件:二級生物安全實(shí)驗(yàn)室(P2負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室)

防護(hù)準(zhǔn)備:檢測人員需進(jìn)行三級防護(hù)的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、醫(yī)用N95口罩、一次性防護(hù)服、一次性鞋套、一次性防水靴套、護(hù)目鏡和雙層乳膠手套。如有條件可加穿一次性隔離衣。                       

檢測步驟:準(zhǔn)備工作,核酸提。ㄊ謩樱,基因擴(kuò)增與檢測,結(jié)果分析                     


1.準(zhǔn)備工作
 

 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:二級生物安全柜,水浴或烘箱,移液器

首先檢查運(yùn)輸罐是否嚴(yán)格密閉,然后取出罐內(nèi)的密封袋進(jìn)行56℃下30分鐘的消毒滅活,滅活后可從密封袋內(nèi)取出采樣管對采集的樣品進(jìn)行分裝、混勻。

整個過程應(yīng)在二級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,滅活設(shè)備應(yīng)盡量選擇可放置于生物安全柜內(nèi)的小型設(shè)備以減少樣品進(jìn)出安全柜內(nèi)的次數(shù)。

 

2.核酸提。ㄊ謩樱
 

 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:二級生物安全柜,移液器,振蕩器,金屬加熱器,微型離心機(jī)

首先需要依據(jù)不同品牌試劑盒的要求進(jìn)行裂解液的配置。然后,采用化學(xué)試劑法對核酸樣本進(jìn)行裂解,樣品裂解前需經(jīng)過充分的振蕩混勻,如有必要可采用金屬加熱器于56℃下充分裂解病毒所釋放出的核酸。通過多次離心完成裂解產(chǎn)物的過濾收集。并且利用離心純化法對裂解后的核酸進(jìn)行洗滌與回收。

 

3.基因擴(kuò)增與檢測
 

實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:生物安全柜,PCR板離心機(jī),實(shí)時熒光定量PCR儀

首先,需根據(jù)不同品牌試劑盒的要求將試劑盒內(nèi)的不同組分(引物,dNTP,聚合酶等)按各自所需的體積量進(jìn)行配置,并充分離心混勻。然后將核酸樣本依次加入至每個PCR反應(yīng)管中,加蓋密閉后進(jìn)行充分的混勻、離心。其次,將PCR反應(yīng)管置于實(shí)時熒光定量PCR儀中,按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行擴(kuò)增參數(shù)的設(shè)置后即開始檢測。

 

4.結(jié)果分析

通過計算出的CT值,依據(jù)檢測試劑盒廠家說明書的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定,陽性、陰性或者不確定。


四、未測樣品的保存

如樣本未能及時檢測,需將樣本于-70℃或以下進(jìn)行保存。Cole-parmer專為您提供保存樣品的Cole-parmer超低溫冰箱。

 

五、消毒處理

生物安全柜內(nèi):對臺面、儀器、外層手套進(jìn)行消毒,相關(guān)垃圾投入專用醫(yī)療垃圾桶中。并開啟紫外燈照射生物安全柜,時長應(yīng)不低于30分鐘。

核酸檢測實(shí)驗(yàn)室內(nèi):對實(shí)驗(yàn)室臺面、地面進(jìn)行消毒,并開啟紫外照射燈進(jìn)行空間消毒,時長應(yīng)不低于30分鐘。

實(shí)驗(yàn)人員:按自上而下、由內(nèi)而外的順序依次摘脫三級防護(hù)穿戴,并置于專用醫(yī)療垃圾桶內(nèi)。

醫(yī)療垃圾:所有與新型冠狀病毒相關(guān)的醫(yī)療垃圾需經(jīng)過濕熱高壓滅菌(121℃,30分鐘)后再作為普通的醫(yī)療垃圾處理,且垃圾袋上應(yīng)標(biāo)注新型冠狀病毒醫(yī)療垃圾的相關(guān)信息。

    

 注意:實(shí)驗(yàn)試劑、設(shè)備等需取得醫(yī)療器械注冊證,科學(xué)研究除外。

相關(guān)公司:科爾帕默儀器(上海)有限公司
聯(lián)系電話:86-21-51099909
E-mail:info.cn@antylia.com


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